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產(chǎn)品名稱:雙縮脲法蛋白含量測定試劑盒

產(chǎn)品型號:BC3180

產(chǎn)品報價:

產(chǎn)品特點:雙縮脲法蛋白含量測定試劑盒
測定意義:樣品可溶性蛋白質(zhì)含量常常用于酶活性計算。此外,可溶性蛋白質(zhì)含量也用于食品等質(zhì)量分
析。
測定原理:強堿性溶液中,雙縮脲與 CuSO4 形成紫色絡(luò)合物;紫色絡(luò)合物顏色的深淺與蛋白質(zhì)濃度成
正比,而與蛋白質(zhì)分子量及氨基酸成分無關(guān),故可用來測定蛋白質(zhì)含量。該方法測定范圍為
1~10mg 蛋白質(zhì),適用于蛋白質(zhì)濃度高的樣品,尤其是動物材料。

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BC3180雙縮脲法蛋白含量測定試劑盒的詳細資料:

雙縮脲法蛋白含量測定試劑盒

試劑組成和配制試劑一:液體×1 瓶,4℃保存。標(biāo)準(zhǔn)品:液體×1 瓶,5 mg/mL,4℃保存。樣品中可溶性蛋白質(zhì)提取 1. 液體樣品:澄清無色液體樣品可以直接測定。 2. 組織樣品:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g 組織,加入 1mL 提取液(自備,根據(jù)需要選用酶提取緩沖液或者蒸餾水或者生理鹽水))冰浴勻漿,8000g,4℃離心 10min,取上清,即待測液。(動物樣品常常需要稀釋) 3. 細菌、真菌:按照細胞數(shù)量(104 個):提取液體積(mL)為 500~1000:1 的比例(建議 500 萬細胞加入 1mL 提取液),冰浴超聲波破碎細胞(功率 300w,超聲 3 秒,間隔 7 秒,總時間 3min);然后 8000g,4℃,離心 10min,取上清置于冰上待測。

雙縮脲法蛋白含量測定試劑盒

測定操作 1. 分光光度計預(yù)熱 30 min,調(diào)節(jié)波長到 540 nm,蒸餾水調(diào)零。 2. 空白管:取 1 mL 玻璃比色皿,加入 200μL 蒸餾水,1000μL 試劑一,混勻后室溫靜置 15 min,于 540nm 比色,記為 A 空白管。 3. 標(biāo)準(zhǔn)管:取 1 mL 玻璃比色皿,加入 200μL 標(biāo)準(zhǔn)液,1000μL 試劑一,混勻后室溫靜置 15 min,于 540 nm 比色,記為 A 標(biāo)準(zhǔn)管。 4. 測定管:取 1 mL 玻璃比色皿,加入 200μL 待測液,1000μL 試劑一,混勻后室溫靜置 15 min,于 540nm 比色,記為 A 測定管。

注意事項: 1.樣品蛋白濃度須在 1~10mg/ml 范圍內(nèi),低于 1mg/ml 不能用此法,高于 10mg/ml 須做相應(yīng)稀釋。因此測定前用 1~2 個樣做預(yù)實驗,確保蛋白濃度在 1~10mg/ml 范圍內(nèi)。 2.待測樣品蛋白提取可用生理鹽水、雙蒸水或不含蛋白的 PBS 提取。該法受硫酸銨、Tris 緩沖液干擾,提取液中應(yīng)不含這些物質(zhì);否則改用 BCA 蛋白質(zhì)含量測定試劑盒。

 

 

 

 

 

 

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