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Ficoll Plus 1.077 細胞分離液

Ficoll Plus 1.077 細胞分離液
貨號：P4350
規(guī)格：200ml
別名 : 人外周血淋巴細胞分離液 人淋巴 ficoll分離液 
儲存條件 : RT 
單位 : 瓶
保存 ：室溫避光儲存，有效期少 2 年。

密度：1.077g/cm3

    Ficoll Plus 1.077是一種無菌的，用于提純少量或大量人外周血中高產和高純度的淋巴細胞的即用型密度梯度介質。基于Boyum發(fā)展方法中的一簡單快速的離心操作來完成純化過程。也可以用來制備除人外周血其他來源的淋巴細胞。

Ficoll分層液法原理簡介
     主要用于分離外周血中的單個核細胞，是一種單次密度梯度離心分離法。聚蔗糖－泛影葡胺是一種較理想的細胞分層液，其主要成分是一種合成的蔗糖聚合物稱聚蔗糖（商品名為Ficoll），分子量為40kD，具有高密度、低滲透壓、無毒性的特點。高濃度的Ficoll溶液粘性高，易使細胞聚集，故通常使用60g/L的低濃度溶液，密度為1.020，添加比重為1.200的泛影葡胺（urografin）以增加密度。國外常用商品Isopaque或Hypaque，故又稱Ficoll-Hypaque分層液，將適量340g/L泛影葡胺加入Ficoll溶液中即可配制成密度合適分層液。分離人外周淋巴細胞以密度為1.077±0.001的分層液佳，因為人的紅細胞密度為1.093，粒細胞密度為1.092，單個核細胞在1.076～1.090之間。而不同動物血中的單個核細胞對分離液的密度要求各不相同，如小鼠為1.088，馬為1.090。分離時先將分層液置試管底層，然后將肝素化全血以Hanks液或PBS液作適當稀釋后，輕輕疊加在分層液上面，使兩者形成一個清晰的界面。水平式離心后，離心管中會出現(xiàn)幾個不同層次的液體和細胞帶（圖20-1）。紅細胞和粒細胞密度大于分層液，同時因紅細胞遇到Ficoll而凝集成串錢狀而沉積于管底。血小板則因密度小而懸浮于血漿中，唯有與分層液密度相當?shù)膯蝹€核細胞密集在血漿層和分層液的界面中，呈白膜狀，吸取該層細胞遞經(jīng)洗滌高心重懸。本法分離單個核細胞純度可達95％，淋巴細胞約占90％～95％，細胞獲得率可達80％以上，其高低與室溫有關，超過25℃時會影響細胞獲得率。

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參考文獻：
《A novel detection method of Cryptosporidium parvum infection in cattle based on Cryptosporidium parvum virus 1》 作者:Lixin Tai,  Jianhua Li,  Jigang Yin,  Nan Zhang,  Ju Yang , He Li, Zhengtao Yang,  Pengtao Gong,  Xichen Zhang 期刊:Acta Biochimica et Biophysica Sinica 影響因子:1.807 PMID:30544221