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產(chǎn)品名稱:基因工程試劑 BL21(DE3)感受態(tài)細(xì)胞

產(chǎn)品型號:C1400

產(chǎn)品報價:

產(chǎn)品特點:北京索萊寶所生產(chǎn)的基因工程試劑 BL21(DE3)感受態(tài)細(xì)胞是采用大腸桿菌BL21(DE3)菌株經(jīng)特殊工藝處理得到的感受態(tài)細(xì) 胞,可用于DNA的化學(xué)轉(zhuǎn)化。使用pUC19 質(zhì)粒檢測,轉(zhuǎn)化效率可達(dá) 107,-70℃保存 6 個月轉(zhuǎn)化效率不改變?;蛐停篎_ ompT hsdSB(rB_mB_)dcm gal(DE3)北京實驗室BL21(DE3)感受態(tài)細(xì)胞價格,咨詢

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C1400基因工程試劑 BL21(DE3)感受態(tài)細(xì)胞的詳細(xì)資料:

基因工程試劑 BL21(DE3)感受態(tài)細(xì)胞
貨號:C1400
規(guī)格:10×100ul / 20×100ul
保存:-70℃保存,運輸為干冰包裝。自收貨之日起液氮保存少一年,-70℃保存少 6 個月。


產(chǎn)品簡介:
本公司生產(chǎn)的BL21(DE3)感受態(tài)細(xì)胞是采用大腸桿菌BL21(DE3)菌株經(jīng)特殊工藝處理得到的感受態(tài)細(xì)胞,可用于DNA的化學(xué)轉(zhuǎn)化。使用pUC19 質(zhì)粒檢測,轉(zhuǎn)化效率可達(dá) 10 7 ,-70℃保存 6 個月轉(zhuǎn)化效率不改變。
基因型:F_ ompT hsdSB(rB_mB_)dcm gal(DE3)
特 點:該菌株用于高效表達(dá)克隆于含有噬菌體 T7 啟動子的表達(dá)載體(如 pET 系列)的基因。T7 噬菌體RNA 聚合酶位于 λ 噬菌體 DE3 區(qū),該區(qū)整合于 BL21 的染色體上。該菌適合表達(dá)非毒性蛋白。


操作方法:  (以下各步驟均為無菌操作)
1、將感受態(tài)細(xì)胞置于冰上融化,以下實驗以 100ul 感受態(tài)細(xì)胞為例。
2、向感受態(tài)細(xì)胞懸液中加入需轉(zhuǎn)化的目的 DNA,注意目的 DNA 的體積不要超過感受態(tài)細(xì)胞懸液體積的十分之一,輕輕旋轉(zhuǎn)離心管以混勻內(nèi)容物,冰浴放置 30 分鐘。
3、將離心管置于 42℃水浴中放置 60-90 秒,然后快速轉(zhuǎn)移到冰浴中放置 2-3 分鐘,注意不要搖動離心管。
4、向離心管中加入 500ul 無菌無抗的 SOC 或 LB 培養(yǎng)基,37℃ 180rpm 振蕩培養(yǎng) 1 小時。目的是使質(zhì)粒上相關(guān)的抗性標(biāo)記基因表達(dá),使菌體復(fù)蘇。
5、取適量已轉(zhuǎn)化的感受態(tài)細(xì)胞涂布含相應(yīng)抗生素的 SOC 或 LB 平板,37℃倒置培養(yǎng) 12-16 小時。涂布用量可根據(jù)具體實驗來調(diào)整,如轉(zhuǎn)化的 DNA 總量較多,可取 100ul 左右的轉(zhuǎn)化產(chǎn)物涂板;反之,如轉(zhuǎn)化的 DNA總量較少,可取 200-300ul 的轉(zhuǎn)化產(chǎn)物涂板。過多菌液可以抑制細(xì)菌生長。如果預(yù)計的克隆較少,可通過離心后吸除部分培養(yǎng)液,懸浮菌體后將其涂布于一個平板中。涂布剩余的菌液可 4℃保存,如果次日的轉(zhuǎn)化菌落數(shù)過少可以將剩下的菌液再涂布新的平板。


注意事項:
1、感受態(tài)細(xì)胞應(yīng)保存在-70℃,不可反復(fù)凍融,否則其轉(zhuǎn)化效率將會降低。
2、實驗過程中應(yīng)嚴(yán)格無菌操作,防止其它 DNA 或雜菌的污染,避免為以后的篩選、鑒定帶來影響。
3、轉(zhuǎn)化時,轉(zhuǎn)化效率與外源 DNA 的濃度在一定范圍內(nèi)成正比,但當(dāng)加入的外源 DNA 量過多或體積過大反而會降低轉(zhuǎn)化效率。轉(zhuǎn)化時 DNA 體積要小于感受態(tài)細(xì)胞體積的十分之一。
4、轉(zhuǎn)化率的計算:轉(zhuǎn)化率=產(chǎn)生菌落的總數(shù)/鋪板 DNA 總量。
5、為防止轉(zhuǎn)化實驗不成功,可以保留部分連接產(chǎn)物,以重新轉(zhuǎn)化,將損失降到低。


相關(guān)產(chǎn)品:
I1020  IPTG  溶液 (50mg/ml)
A1170 氨芐青霉素儲存液 (100mg/ml)
K1030  Kanamycin (100mg/ml) 卡那霉素
L1015  LB 固體培養(yǎng)基 ( 干粉 )
L1020  SOC 液體培養(yǎng)基 ( 干粉 )
X1010  X-gal(20mg/ml)

 

基因工程試劑 BL21(DE3)感受態(tài)細(xì)胞訂購說明:
1、絕大部分產(chǎn)品備有現(xiàn)貨,一般情況下都能訂貨當(dāng)日發(fā)貨。 
2、部分非常用產(chǎn)品,需提前1-2日預(yù)訂,海外期貨則需要提前3-6周預(yù)訂。 
3、部分產(chǎn)品價格會因貨期、批次等因素發(fā)生變化,若有變動以訂貨當(dāng)日新價格為準(zhǔn)。 
4、每日訂單截止時間為16點整,部分城市可到17點整,因超過截止時間造成當(dāng)日不能發(fā)貨的將于次日安排發(fā)貨。
5、請辦理完貨款后,將收據(jù)、底單等連同收貨人的地址、姓名、等以傳真、、短信、等形式通知我們。


運輸說明:
1、極低溫產(chǎn)品:極低溫產(chǎn)品運輸過程中加裝干冰運輸。用干冰把產(chǎn)品包裹起來,再用泡沫盒密封,膠帶層層粘住泡沫盒,放入索萊寶的箱子,然后交付給合作快遞,安全快速高效放心的送客戶的手中,保證產(chǎn)品的性質(zhì)穩(wěn)定如一,為您的實驗保駕護(hù)航。
2、低溫產(chǎn)品:低溫產(chǎn)品運輸過程中加裝索萊寶冰袋運輸。事先用冰袋把產(chǎn)品包裹起來,再使用泡沫盒密封,用膠帶嚴(yán)實密封泡沫盒,再放入索萊寶的箱子(保溫效果少可以持續(xù)一周),然后交付給合作快遞,安全快速高效放心的送客戶的手中,保證產(chǎn)品的性質(zhì)穩(wěn)定如一,為您的實驗保駕護(hù)航。
3、常溫產(chǎn)品:常溫產(chǎn)品運輸過程中無需加冰或者特殊包裝。產(chǎn)品由公司庫房人員快速配貨,準(zhǔn)確快速高效的快遞保證產(chǎn)品快速送達(dá)您的手中。

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