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產(chǎn)品名稱:亞細(xì)胞器提取試劑盒細(xì)胞核提取試劑盒

產(chǎn)品型號:SN0020

產(chǎn)品報(bào)價:

產(chǎn)品特點(diǎn):亞細(xì)胞器提取試劑盒細(xì)胞核提取試劑盒
貨號:SN0020
規(guī)格:50T/100T
保存:短期使用可 4℃儲存,長期保存請置于-20℃或-70℃。

免費(fèi)咨詢:010-50973130

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SN0020亞細(xì)胞器提取試劑盒細(xì)胞核提取試劑盒的詳細(xì)資料:

亞細(xì)胞器提取試劑盒細(xì)胞核提取試劑盒
貨號:SN0020
規(guī)格:50T/100T
保存:短期使用可 4℃儲存,長期保存請置于-20℃或-70℃。


產(chǎn)品內(nèi)容:

組份SN0020 -50SN0020-100
Lysis Buffer 100 mL200 mL
Reagent A2.5mL5mL
Medium Buffer25 mL50 mL
Store Buffer5 mL10 mL


產(chǎn)品簡介:
    細(xì)胞核提取試劑盒用于從動物細(xì)胞或組織中分離出完整而純化的細(xì)胞核。 適合于動物軟組織 (肝或腦組織)和硬組織(肌肉)以及培養(yǎng)細(xì)胞的細(xì)胞核的制備。其制備物產(chǎn)量高,可以被用于細(xì)胞凋亡、信號傳遞、代謝和蛋白組學(xué)等的研究。產(chǎn)品不含污染性蛋白酶和核酶,性能穩(wěn)定。


操作步驟:
1. 樣本處理
    a. 組織勻漿:稱取 100~200 mg新鮮組織如肝臟、腦、心肌等,PBS或生理鹽水沖洗,洗凈血水,濾紙吸干,用剪刀剪為碎塊放入小容量玻璃勻漿器內(nèi)。加入 1.0 mL預(yù)冷的Lysis Buffer,再加入 50ulLReagent A , 0℃冰浴中上下研磨組織 20 次;有未研磨開的組織,可用雙層紗布過濾。
   b. 培養(yǎng)細(xì)胞勻漿:消化細(xì)胞,PBS洗滌,800 g 離心 5~10 min收集細(xì)胞,計(jì)數(shù)。每次提取需要 5 ×10 7 個細(xì)胞,加入 1.0 mL冰預(yù)冷的Lysis Buffer重懸細(xì)胞,再加入 50ul Reagent A,將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到小容量玻璃勻漿器內(nèi),0℃冰浴研磨細(xì)胞 20~30 次。
2. 將組織或細(xì)胞勻漿物轉(zhuǎn)移到 1.5ml離心管中,4℃,700g 離心 5 min。細(xì)胞核沉淀在收集管底部,棄上清。加入 0.5 mL冰預(yù)冷的Lysis Buffer重懸沉淀。
3. 取另一新離心管內(nèi)加入 0.5 mL Medium Buffer,吸取上一步的重懸液,沿管壁小心地加入到此離心管中,置于Medium Buffer之上,4℃,700 g 離心 5min。細(xì)胞核沉淀在管底。
4. 棄上清,在細(xì)胞核沉淀中加入 0.5 mL Lysis Buffer重懸細(xì)胞核沉淀,1000g 離心 10min ,棄上清,得到較純的細(xì)胞核沉淀。
5. 用 50-100μL Store Buffer 或合適的反應(yīng)緩沖液重懸細(xì)胞核沉淀,立即使用或-70℃保存。


注意事項(xiàng):
    1. 為保證獲得完整的細(xì)胞核,務(wù)必做到:*,全程低溫操作;第二,快速;第三,在不破壞亞細(xì)胞器的情況下破碎細(xì)胞,這是制備細(xì)胞核的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。與組織塊相比,培養(yǎng)細(xì)胞特別是貼壁培養(yǎng)細(xì)胞在用玻璃勻漿器勻漿時較難破壁,因而要選用小容量玻璃勻漿器、間隙嚴(yán)密的研杵上下研磨培養(yǎng)細(xì)胞。
   2. 以離心力g計(jì)算正確的離心速度,不同的離心機(jī)可據(jù)此計(jì)算離心速度。
   3. 進(jìn)行Western Blot和 2D-膠電泳,可直接加入上樣緩沖液裂解細(xì)胞核。
轉(zhuǎn)速與離心力換算:
G=1.11×(10-5)×R×[rpm] 2
G為離心力,一般以g(重力加速度)的倍數(shù)來表示;
[rpm] 2 即:轉(zhuǎn)速的平方; R為半徑,單位為厘米。


相關(guān)產(chǎn)品:

P1020 1×PBS , PH7.2-7.4 , 0.01M
P1015 4× 蛋白上樣緩沖液(含 DTT )
SM0020 線粒體提取試劑盒

 

亞細(xì)胞器提取試劑盒細(xì)胞核提取試劑盒訂購說明:

1、絕大部分產(chǎn)品備有現(xiàn)貨,一般情況下都能訂貨當(dāng)日發(fā)貨。 
2、部分非常用產(chǎn)品,需提前1-2日預(yù)訂,海外期貨則需要提前3-6周預(yù)訂。 
3、部分產(chǎn)品價格會因貨期、批次等因素發(fā)生變化,若有變動以訂貨當(dāng)日新價格為準(zhǔn)。 
4、每日訂單截止時間為16點(diǎn)整,部分城市可到17點(diǎn)整,因超過截止時間造成當(dāng)日不能發(fā)貨的將于次日安排發(fā)貨。
5、請辦理完貨款后,將收據(jù)、底單等連同收貨人的地址、姓名、等以傳真、、短信、等形式通知我們。


運(yùn)輸說明:

1、極低溫產(chǎn)品:極低溫產(chǎn)品運(yùn)輸過程中加裝干冰運(yùn)輸。用干冰把產(chǎn)品包裹起來,再用泡沫盒密封,膠帶層層粘住泡沫盒,放入索萊寶的箱子,然后交付給合作快遞,安全快速高效放心的送客戶的手中,保證產(chǎn)品的性質(zhì)穩(wěn)定如一,為您的實(shí)驗(yàn)保駕護(hù)航。
2、低溫產(chǎn)品:低溫產(chǎn)品運(yùn)輸過程中加裝索萊寶冰袋運(yùn)輸。事先用冰袋把產(chǎn)品包裹起來,再使用泡沫盒密封,用膠帶嚴(yán)實(shí)密封泡沫盒,再放入索萊寶的箱子(保溫效果少可以持續(xù)一周),然后交付給合作快遞,安全快速高效放心的送客戶的手中,保證產(chǎn)品的性質(zhì)穩(wěn)定如一,為您的實(shí)驗(yàn)保駕護(hù)航。
3、常溫產(chǎn)品:常溫產(chǎn)品運(yùn)輸過程中無需加冰或者特殊包裝。產(chǎn)品由公司庫房人員快速配貨,準(zhǔn)確快速高效的快遞保證產(chǎn)品快速送達(dá)您的手中。

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