无码人妻精品一区二区蜜桃,yin荡娇妻肉欲放纵,农村女妓女野外bbw,欧美大肥婆bbbww

歡迎來(lái)北京索萊寶科技有限公司!我們將為您提供周到的服務(wù)!
首頁(yè) > 產(chǎn)品中心 > > > E010050 Uracil-DNA Glycosylase 尿嘧啶糖基化酶

產(chǎn)品名稱:E010050 Uracil-DNA Glycosylase 尿嘧啶糖基化酶

產(chǎn)品型號(hào):

產(chǎn)品報(bào)價(jià):

產(chǎn)品特點(diǎn):E010050 Uracil-DNA Glycosylase 尿嘧啶糖基化酶
其作用原理基于:如果在PCR反應(yīng)中以dUTP替代dTTP摻入DNA中,形成了含dU堿基的PCR擴(kuò)增產(chǎn)物,該酶能選擇性斷裂單鏈和雙鏈DNA中U堿基的糖苷鍵,降解該P(yáng)CR擴(kuò)增產(chǎn)物。

免費(fèi)咨詢:010-50973130

發(fā)郵件給我們:3193328036@qq.com

分享到:

E010050 Uracil-DNA Glycosylase 尿嘧啶糖基化酶的詳細(xì)資料:

產(chǎn)品介紹:
尿嘧啶DNA糖苷酶(UNG)來(lái)源于大腸桿菌重組克隆表達(dá),分子量為25kDa,可催化含尿嘧啶的單鏈和雙鏈DNA釋放游離尿嘧啶。UNG酶對(duì)RNA無(wú)活性,主要應(yīng)用于PCR擴(kuò)增產(chǎn)物的防污染。其作用原理基于:如果在PCR反應(yīng)中以dUTP替代dTTP摻入DNA中,形成了含dU堿基的PCR擴(kuò)增產(chǎn)物,該酶能選擇性斷裂單鏈和雙鏈DNA中U堿基的糖苷鍵,降解該P(yáng)CR擴(kuò)增產(chǎn)物。

規(guī)格:1U/μl

儲(chǔ)存緩沖液:
20mM Tris-HCl(pH8.0,25℃),150mM NaCl,1mM EDTA,1mM DTT,0.05% Tween20,50%glycerol.

試劑組成:

10×Reaction Buffer:200mM Tris-HCl(pH8.0,25℃),100mM NaCl,10mM EDTA,1mg/ml BSA.

活性定義:
37℃條件下,1小時(shí)降解1μgdU堿基的單鏈DNA的酶量為1單位。

保存條件:
每天或每周使用保存于-20℃。長(zhǎng)期儲(chǔ)存應(yīng)保存于-70℃保存,并嚴(yán)格避免-70℃保存時(shí)反復(fù)凍融。

質(zhì)量控制:

1、SDS-PAGE電泳純度大于98%

2、1U UNG在 37℃處理3分鐘后,103拷貝以下含U模版應(yīng)*降解,不能產(chǎn)生擴(kuò)增產(chǎn)物。

3、無(wú)核酸外切酶和核酸內(nèi)切酶活性、RNase酶活性;

1SDS-PAGE 銀染純度大于98%


2UNG 酶消化能力試驗(yàn)


    以700bp含dUTP的不同拷貝數(shù)基因片段為模板,分別加入含0.5U UNG酶的50μl PCR反應(yīng)體系,50 消化2min,94℃ 滅活4min后進(jìn)行PCR擴(kuò)增反應(yīng)。

A. Biori UNG

B. Promega UNG

Lane 1:Negative control no template

Lane 2:positive control(no UNG;

Lane 3~lane 10103 to 1010 copies of template 

結(jié)果表明,我們的UNG酶與Promega UNG酶消化效果相當(dāng),均可以有效控制108拷貝以下含有U-DNA的模板的污染。

(3)UNG酶穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)

UNG酶置于37℃進(jìn)行7天加速試驗(yàn)。以含dUTP的(106、107108、109 copies/ml)基因?yàn)槟0?,采用?/span>dUTP的體系進(jìn)行PCR擴(kuò)增,50μl反應(yīng)體系加入0.5U UNG酶,于50℃消化2min,94℃滅活4min;然后進(jìn)行PCR擴(kuò)增反應(yīng)。以Promega公司UNG酶為對(duì)照,考察UNG酶對(duì)模板的消化效果。





1negativeNo template); 

29postive 104、105、106、107、108、109、1010、1011 copies /ml, No UNG);

1014control Promega UNG106、107、108、109、1010 copies /ml);

1519Sample UNG106、107、108、109、1010 copies/ml。



14Sample UNG106、107、108、109 copies/ml);

58Control Promega UNG106、107、108、109 copies/ml); 

9negative No template);

1013Postive 106、107、108、10copies/ml,No UNG)。




結(jié)果表明,我們的UNG酶與Promega UNG酶穩(wěn)定性相當(dāng),均可以在37℃加速7天,仍保持對(duì)107copies/mldUTP模板的消除能力。

反應(yīng)條件:

Component

Volumeper

Reactionμl

Concentration in Master Mix

Template

*

< 1μg/reaction

Primer1

1~5

0.2~1.0μM

Primer 2

1~5

0.2~1.0μM

d NTPs

replace dTTP for 150μM~600μM dUTP) 

1

150μM

dATP、dGTP、dCTP

10×PCR Buffer

5

25mM MgCl2

2~8

1.0~4.0mM

 Taq5U/μl

0.25

1.25U

UNG(1U/μl

0.25

0.1~0.5

0.25U

0.1~0.5U

H2O

*

——

Total volume

50μl


1、Incubate the product for 2 min at 50℃;

2、Inactivate UNG by heating to 95℃ for 5 min.

注意事項(xiàng):
1、避免多次凍融,切勿暴露在溫度波動(dòng)較大之處。溫度波動(dòng)對(duì)產(chǎn)品的穩(wěn)定性有極大影響。

2、尿嘧啶DNA糖基酶可以在PCR反應(yīng)前清除不慎污染的U-DNA分子。為有效防止污染,一個(gè)實(shí)驗(yàn)室必須在所有的PCR反應(yīng)中均使用dUTP作為dNTPs組分之一進(jìn)行擴(kuò)增,使所有擴(kuò)增產(chǎn)物都成為U-DNA。

3、由于不同基因堿基組成不同,因此有些基因?qū)?/span>UNG酶殘留活性十分敏感,如發(fā)現(xiàn)使用UNG 酶影響擴(kuò)增靈敏度,可以嘗試降低UNG酶的用量或?qū)Ψ磻?yīng)體系中dTTPdUTP的比例進(jìn)行調(diào)整。推薦使用我公司生產(chǎn)的TS-UNG,該酶滅活更加*,可以大大簡(jiǎn)化上述試驗(yàn)過(guò)程。

 相關(guān)同類產(chǎn)品:

留言框

  • 產(chǎn)品:

  • 您的單位:

  • 您的姓名:

  • 聯(lián)系電話:

  • 常用郵箱:

  • 省份:

  • 詳細(xì)地址:

  • 補(bǔ)充說(shuō)明:

  • 驗(yàn)證碼:

    請(qǐng)輸入計(jì)算結(jié)果(填寫阿拉伯?dāng)?shù)字),如:三加四=7

版權(quán)所有  ICP備案號(hào): 管理登陸 技術(shù)支持:化工儀器網(wǎng)   總流量:881030  網(wǎng)站地圖

日韩精品久久无码中文字幕| 成人无码A级毛片免费| 4438全国大成网人网站| 久久精品国产99久久丝袜| 国色天香一卡2卡三卡4卡乱码| 末成年娇小性色XXXXX| 国产特级毛片aaaaaa高清| 亚洲色成人网站www永久四虎 | 啊灬啊别停灬用力啊爷小说| 国产婷婷成人久久av免费高清 | 人妻少妇精品中文字幕AV| 老师在办公室里给我开除了| barazza厨房乱战| 灌牛奶cao哭男男腐纯肉打屁股| 公交车上拨开少妇内裤进入| 强行无套内谢大学生初次| 人妻日本无中文字幕无码 | 特色表演| 色AV综合AV综合无码网站| 猛烈顶弄h禁欲老师h春潮| 国产肉体XXXX裸体784大胆| 普通话丰满的少妇xxxxx野外| A级精品国产片在线观看| 国产性生交xxxxx无码| 男人J放进女人P全黄| 伸进内衣揉捏她的乳尖视频| 少妇被粗大猛进去69影院| 国产女人的高潮国语对白入口| 免费人妻精品一区二区三区| 欧美激情综合色综合啪啪五月| 麻豆免费视频网站入口在线观看 | 阿娇手扒性器全部图片| 疯狂揉肉蒂高潮h失禁视频| 18禁止进入1000部高潮网站| 成人白浆超碰人人人人| 福利cosplayh裸体の福利| 国产精品99无码一区二蜜桃| 国产乱视频在线观看| 感受大海的时刻| 国产色婷亚洲99精品av在线| 亚洲av永久精品无码桃色|