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產(chǎn)品名稱:內(nèi)毒素去除劑

產(chǎn)品型號(hào):E1040

產(chǎn)品報(bào)價(jià):

產(chǎn)品特點(diǎn):本公司生產(chǎn)的內(nèi)毒素去除劑主要用于清除 DNA、蛋白質(zhì)或其他液體樣品中的內(nèi)毒素。在特定的 pH 值、 鹽濃度和溫度條件下,內(nèi)毒素清除劑能與 DNA、重組蛋白以及液體樣品中的內(nèi)毒素特異性結(jié)合,經(jīng)過(guò)室溫高 速離心后,DNA 或蛋白質(zhì)等保留在水相,而內(nèi)毒素則被濃縮到極小體積的下層相而被清除。經(jīng)過(guò) 3 次以上重 復(fù)抽提后可將活性為 5000~50000 EU/ml 的內(nèi)毒素水平降低到 5~0.5 EU/m

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E1040內(nèi)毒素去除劑的詳細(xì)資料:

內(nèi)毒素去除劑產(chǎn)品簡(jiǎn)介:    

        本公司生產(chǎn)的內(nèi)毒素清除劑主要用于清除 DNA、蛋白質(zhì)或其他液體樣品中的內(nèi)毒素。在特定的 pH 值、 鹽濃度和溫度條件下,內(nèi)毒素清除劑能與 DNA、重組蛋白以及液體樣品中的內(nèi)毒素特異性結(jié)合,經(jīng)過(guò)室溫高 速離心后,DNA 或蛋白質(zhì)等保留在水相,而內(nèi)毒素則被濃縮到極小體積的下層相而被清除。經(jīng)過(guò) 3 次以上重 復(fù)抽提后可將活性為 5000~50000 EU/ml 的內(nèi)毒素水平降低到 5~0.5 EU/ml 以下,即降低 1000~10000 倍。


內(nèi)毒素去除劑操作步驟:    

       提取前請(qǐng)將內(nèi)毒素清除劑放在冰上冰浴 5min,期間翻轉(zhuǎn)瓶子數(shù)次使試劑均勻預(yù)冷。    

1、 a)已純化的質(zhì)粒 DNA 內(nèi)毒素清除:吸取 500μl DNA 溶液于微型離心管,加入 1/10 體積 3M NaAc pH5.2 或 1/20 體積 5M NaCl 溶液,冰浴 5min。   

b)在提取質(zhì)粒 DNA 過(guò)程中清除內(nèi)毒素:以堿裂解法提取質(zhì)粒為例,在加入裂解液和中和液并離心去除 碎片之后,吸取含質(zhì)粒 DNA 的上清于新離心管中,冰浴 5min。   

 2、加入 1/5 體積預(yù)冷的內(nèi)毒素清除劑,振蕩混勻,溶液變渾濁。    

3、冰浴 5min,溶液應(yīng)變清亮。    

4、37℃水浴 5min,不時(shí)振蕩,溶液又變渾濁。    

5、12000rpm 室溫離心 5min,溶液應(yīng)分為兩相,上層水相含 DNA,下層油狀相含內(nèi)毒素。    

6、將含 DNA 的上層水相轉(zhuǎn)移到新管,棄油狀相,重復(fù)抽提三次,即重復(fù)步驟 2-6 三次。    

7、加入 2.5 體積無(wú)水乙醇,-20℃沉淀 30min 或過(guò)夜;12000rpm 離心 10min,棄上清;加入 70%乙醇洗 滌沉淀,12000rpm 離心 5min 棄上清;空氣干燥沉淀,加入 100~200μl 無(wú)內(nèi)毒素的高純水或 TE 溶解沉淀。    

8、用內(nèi)毒素檢測(cè)試劑測(cè)定樣品中內(nèi)毒素活性,并與初始樣品比較。

注意事項(xiàng):

1、DNA 濃度>1mg/ml 時(shí)清除內(nèi)毒素效率降低。由于 DNA 和蛋白質(zhì)本身的性質(zhì),清除程序可導(dǎo)致 10-20 %的 DNA 丟失,所幸的是與清除內(nèi)毒素的艱難相比 DNA 更容易提取制備。    

2、所有溶液應(yīng)用無(wú)內(nèi)毒素的高純水配制,所有器械材料均應(yīng)不含內(nèi)毒素,玻璃器皿可高溫烘烤,非揮發(fā) 性水溶液可高壓 120℃高溫處理?。

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