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產(chǎn)品名稱:脯氨酸(PRO)含量檢測(cè)試劑盒(微量法)

產(chǎn)品型號(hào):

產(chǎn)品報(bào)價(jià):

產(chǎn)品特點(diǎn):脯氨酸(PRO)含量檢測(cè)試劑盒(微量法)
Pro廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,逆境條件下,植物體內(nèi)Pro含量顯著增加。Pro增加量在一定程度上反映了抗逆性,抗旱性強(qiáng)的品種往往積累較多的脯氨酸。因此,脯氨酸增加量可以作為抗逆育種的生理指標(biāo)之一。

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脯氨酸(PRO)含量檢測(cè)試劑盒(微量法)的詳細(xì)資料:

脯氨酸(PRO)含量檢測(cè)試劑盒(微量法)說明書

貨號(hào):BC0255

規(guī)格: 100T/96S

脯氨酸(PRO)含量檢測(cè)試劑盒(微量法)?產(chǎn)品簡(jiǎn)介:

HYP是機(jī)體膠原蛋白主要成分之一,膠原蛋白大多分布于皮膚、軟骨和血管等,因此HYP含是反映膠原組織代謝及纖維化程度的一項(xiàng)要指標(biāo)。

樣品經(jīng)水解產(chǎn)生游離的HYP,進(jìn)一補(bǔ)被氯胺T氧化,氧化產(chǎn)物與對(duì)二甲氨基苯甲醛反應(yīng),產(chǎn)生紅色化合物,在560nm處有特征吸收峰。通過測(cè)定樣品水解液560nm吸光值,可計(jì)算HYP含。

產(chǎn)品內(nèi)容:

組織提取液:6mol/L鹽酸,自備。濃鹽酸:H2O(V/V)= 1:1,室溫保存; 

細(xì)胞提取液:液體100mL×1 瓶,4 保存;  

試劑一:液體10mL×1 瓶,4 避光保存  

試劑二:液體10mL×1 瓶,4 避光保存

脯氨酸(PRO)含量檢測(cè)試劑盒(微量法)操作步驟:

一、羥脯氨酸提?。? 

1. 組織:取約0.2g 樣品于玻璃管,加入2mL的組提取液,置于110℃烘箱,水解612小時(shí),16000rpm,25℃,離心20min,用提取液定容2mL,取上清待測(cè)。  

2.  細(xì)胞:取約500 萬個(gè)細(xì)胞,加入1mL 的細(xì)胞提取液,于高壓消毒器中15 磅保持30min,自然降壓后待測(cè)。

二、測(cè)定操作:

 

對(duì)照管

測(cè)定管

樣本(uL)

 

60

試劑一(uL)

60

60

混勻,室溫靜置20min

試劑二(uL)

60

60

H2O(uL)

180

120

混勻,60℃,20min,取出后室溫靜置15 min,測(cè)定A560。(A560=A測(cè)定-A對(duì)照)

羥脯氨酸含量計(jì)算:

用微量比色皿測(cè)定的計(jì)算公式:

標(biāo)準(zhǔn)曲線:y=64.875x+ 0.0251,R2=0.9991  

(1)按組織計(jì)算  

HYP含量(mg/g) =(A560-0.0251)÷64.875×V 反總÷(V 樣÷V 樣總×W)  

                         =0.154×(A560-0.0251)÷W  

(3)按細(xì)胞計(jì)算:

HYP含量(mg/104cell)= (A560-0.0251)÷64.875×V 反總÷V 樣×V 樣總÷細(xì)胞數(shù)量(萬個(gè))

=0.077×(A560-0.0251)÷細(xì)胞數(shù)量(萬個(gè))

V反總:反應(yīng)體系總體積,0.3mL; V樣:反應(yīng)中樣本體積,0.06mL;V樣總:加入提取液體積,mL; W:樣本質(zhì)量,g。

用96孔板測(cè)定的計(jì)算公式如下:

標(biāo)準(zhǔn)曲線:y=32.4375x+ 0.0251,R2=0.9991  

(1)按組織計(jì)算  

HYP含量(mg/g) =(A560-0.0251)÷32.4375×V 反總÷(V 樣÷V 樣總×W)  

                         =0.308×(A560-0.0251)÷W  

(3)按細(xì)胞計(jì)算:

HYP含量(mg/104cell)= (A560-0.0251)÷32.4375×V 反總÷V 樣×V 樣總÷細(xì)胞數(shù)量(萬個(gè))

=0.154×(A560-0.0251)÷細(xì)胞數(shù)量(萬個(gè))  

V反總:反應(yīng)體系總體積,0.3mL; V樣:反應(yīng)中樣本體積,0.06mL;V樣總:加入提取液體積,mL; W:樣本質(zhì)量,g。

 

注意事項(xiàng)

1、OD值大于0.8,樣品適當(dāng)稀釋再測(cè)定,注意計(jì)算公式乘以稀釋倍數(shù)。

2、試劑有一定的毒性,請(qǐng)操作時(shí)做好防護(hù)措施,防止吸入或與皮膚接觸。

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