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產(chǎn)品名稱:普魯士藍染色試劑盒(伊紅法)

產(chǎn)品型號:G1424

產(chǎn)品報價:

產(chǎn)品特點:普魯士藍染色試劑盒(伊紅法)
含鐵血黃素(hemosiderin)是一種血紅蛋白源性色素,為金黃色或棕黃色顆粒,因其含鐵、金黃色,故稱為含鐵血黃素。當紅細胞被巨噬細胞吞噬后,在溶酶體酶的作用下,血紅蛋白被分解為不含鐵的橙色血質(zhì)和含鐵的含鐵血黃素。

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G1424普魯士藍染色試劑盒(伊紅法)的詳細資料:

普魯士藍染色試劑盒(伊紅法)

產(chǎn)品簡介:

含鐵血黃素(hemosiderin)是一種血紅蛋白源性色素,為金黃色或棕黃色顆粒,因其含鐵、金黃色,故稱為含鐵血黃素。當紅細胞被巨噬細胞吞噬后,在溶酶體酶的作用下,血紅蛋白被分解為不含鐵的橙色血質(zhì)和含鐵的含鐵血黃素。Perls普魯士藍反應(yīng)(Prussian blue reaction)又稱為含鐵血黃素染色,常見于吞噬細胞內(nèi)或間質(zhì)內(nèi),主要顯示三價鹽。Perls普魯士藍是非常經(jīng)典的組織化學(xué)反應(yīng),是顯示組織內(nèi)三價鐵的一種敏感、傳統(tǒng)優(yōu)良的方法,:常用于顯示局部組織內(nèi)的各種出血性病變,常見于吞噬細胞內(nèi)。

在判斷含鐵血黃素沉積時,用Perls反應(yīng)可以得到證實, 該染色法可以很好地區(qū)分含鐵血黃素與其他色素。該染色液穩(wěn)定性好、可以長期保存、不易產(chǎn)生沉淀、應(yīng)用范圍廣,可以進行復(fù)染。 其復(fù)染液采用伊紅染色液,也是常用的復(fù)染液,該復(fù)染液染色時間較核固紅染色液要短。

普魯士藍染色試劑盒(伊紅法) 

操作步驟(僅供參考):

(一)石蠟切片染色

1、 切片脫蠟水 ① 二甲苯(Ⅰ) 5~10min ② 二甲苯(Ⅱ) 5~10min ③無水乙醇(Ⅰ)(可選) 3~5min ④無水乙醇(Ⅱ)(可選) 3~5min ⑤95%的乙醇 3~5min ⑥90%的乙醇 3~5min ⑦80%的乙醇 3~5min ⑧自來水或蒸餾水沖洗(Ⅰ) 1~3min ⑨自來水或蒸餾水沖洗(Ⅱ) 1~3min

2、染色 ①切片入 Perls stain(見注意事項 6) 15~30min ②蒸餾水充分沖洗 5~10min ③伊紅染色液淡染細胞核 15~30s ④自來水沖洗 1~5s。

3、脫水、透明、封固 ①90%乙醇 10~20s ②95%乙醇(Ⅰ) 1~2min ③95%乙醇(Ⅱ) 1~2min ④ 無水乙醇(Ⅰ) 2~3min ⑤無水乙醇(Ⅱ) 2~3min ⑥ 二甲苯(Ⅰ) 2~3min ⑦二甲苯(Ⅱ) 2~3min ⑧ 二甲苯(Ⅲ) 2~3min ⑨中性樹脂封片。

(二)冰凍切片染色

1、 無需脫蠟,直接迅速用蒸餾水沖洗 2~3min。

2、 染色、脫蠟、透明、封固步驟同石蠟切片的染色步驟。

(三)細胞染色

1、4%多聚甲醛固定 10~20min。

2、自來水沖洗 2 次,每次 2min。

3、蒸餾水沖洗 2 次,每次 2min。

4、染色、脫蠟、透明、封固步驟同石蠟切片的染色步驟。

染色結(jié)果:含鐵血黃素或三價鐵 藍色細胞核、其他組織 紅色陰性對照(可選)取相同連續(xù)切片脫蠟水。置于 5%的草酸中,孵育 2-6h 后,經(jīng) Perla stain,需要步驟同上。結(jié)果為陰性。

注意事項: 1、 切片脫蠟應(yīng)盡量干凈。 2、 組織固定常采用 10%的中性福爾馬林,經(jīng)普通福爾馬林長期固定后,組織會有損傷。 3、 臨用前取 A1、A2 液等量混合,即為試劑(A),現(xiàn)配現(xiàn)用,不可提前配制。 4、整個操作過程中容器要干凈,避免使用金屬鐵制品,洗切片和容器時以蒸餾水為宜,因普通水內(nèi)含鐵質(zhì)。 5、避免使用酸性固定劑,鉻酸鹽處理也會妨礙鐵的保存。 6、Perls stain 染色時,應(yīng)根據(jù)樣品情況調(diào)整著色時間。 7、所有檢查切片都應(yīng)使用同一個陽性對照切片,選擇適合的對照非常重要.尸檢肺組織是一個很好的對照,包含相當數(shù)量的鐵陽性巨噬細胞(心衰細胞). 8、95%乙醇、90%乙醇應(yīng)經(jīng)常更換新液. 9、 冰凍切片和細胞的染色,應(yīng)根據(jù)具體情況摸索實驗條件. 10、 為了您的健康和安全,請穿實驗服并戴一次性手套操作.

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