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產(chǎn)品名稱:瓊脂糖凝膠CL-2B

產(chǎn)品型號(hào):

產(chǎn)品報(bào)價(jià):

產(chǎn)品特點(diǎn):瓊脂糖凝膠CL-2B
適用于工業(yè)規(guī)模生產(chǎn),廣泛用于生物制藥和生物工程下游蛋白質(zhì)、核酸及多肽的凝膠色譜純化。

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瓊脂糖凝膠CL-2B的詳細(xì)資料:

瓊脂糖凝膠CL-2B

貨號(hào):S8731

規(guī)格:10ml/100ml

一、瓊脂糖凝膠CL-2B簡(jiǎn)介

瓊脂糖凝膠CL-2B是在瓊脂糖凝膠2B的基礎(chǔ)上通過(guò)交聯(lián)使微球的剛性增強(qiáng),理化性能提高,有利用于工業(yè)生產(chǎn)。該介質(zhì)用于生物大分子的凝膠層析。

本品呈白色球狀凝膠,無(wú)嗅、無(wú)味、無(wú)肉眼可見雜質(zhì)。

二、親和填料特性

項(xiàng)    目

指     標(biāo)

基   質(zhì)

2%交聯(lián)瓊脂糖

排阻極限

70000~40×106 (球蛋白)

形狀

球形

粒徑

60~200 μm

檢測(cè)流速

100 cm/h*

耐熱

pH7水中12020min

耐壓

0.025 MPa

pH穩(wěn)定性

3~13(長(zhǎng)時(shí)間),2~14(短時(shí)間,在位清洗)

化學(xué)穩(wěn)定性

可耐8mol/L尿素、6mol/L鹽酸胍;可耐有機(jī)溶劑,如乙醇、DMF、THF、DMS、CH3Cl、丙酮、二甲基甲酰胺、二氯乙烷、吡啶、乙腈

*檢測(cè)條件: 層析柱10mm×300mm  *柱床高15cm,25,流動(dòng)相為0.1mol/LNaCl。

三、 適用范圍

本產(chǎn)品具有很高的化學(xué)穩(wěn)定性、高流速、較好的機(jī)械性能、可多次重復(fù)使用等特點(diǎn),非特異性吸附低,回收率高,可用有機(jī)溶劑及1~2mol/L 的NaOH在位清洗,適用于工業(yè)規(guī)模生產(chǎn),廣泛用于生物制藥和生物工程下游蛋白質(zhì)、核酸及多肽的凝膠色譜純化。

四、注意事項(xiàng)

產(chǎn)品應(yīng)密封貯存在4~25(保存溶液為20% 乙醇),通風(fēng)、干燥、清潔的地方。不能冷凍。

用過(guò)的柱子貯存在4(20% 乙醇)。

本產(chǎn)品避免與氧化劑接觸;避免長(zhǎng)時(shí)間暴露在空氣中

保質(zhì)期:5年。

五、操作步驟:

1、裝柱

凝膠過(guò)濾介質(zhì)的使用對(duì)裝柱的要求較高,為了保證分離效果,一般通過(guò)柱子上加一個(gè)裝柱器來(lái)使分離柱裝滿凝膠,或采用帶有軸向加壓裝置的柱子。凝膠柱床一般高于60cm。裝柱效果可用染料或丙酮-水溶液進(jìn)行檢驗(yàn)。

以下過(guò)程為通用介質(zhì)裝填過(guò)程。若為帶有軸向加壓裝置的柱子,可在柱床穩(wěn)定后將柱床壓緊,接好管路。

(1)讓所有的材料和試劑達(dá)到室溫。配制緩沖液。凝膠層析上樣、平衡和洗脫只用一種低鹽濃度的緩沖液。

   (2)選擇一根一定直徑的柱子,長(zhǎng)約30~60cm,根據(jù)柱子大小取所需量的凝膠(約為柱床體積的1.15倍),清洗掉20%乙醇,抽干,用緩沖液(按凝膠:緩沖液=3:1的比例)配成勻漿。

(3)將柱內(nèi)及柱子底端用水或緩沖液潤(rùn)濕并保持一小段液位(液面略高于濾膜),務(wù)必使底端無(wú)氣泡。

(4)用玻璃棒引導(dǎo)勻漿沿著柱內(nèi)壁一次性倒入柱內(nèi),注意勿使產(chǎn)生氣泡。打開柱子出液口,使凝膠在柱內(nèi)自由沉降,連結(jié)好柱子頂端柱頭。

5打開蠕動(dòng)泵,讓緩沖液用使用時(shí)流速的1.33倍的流速流過(guò),使柱床穩(wěn)定。用緩沖液平衡柱子,到柱床穩(wěn)定。

6推薦用一個(gè)裝柱器輔助裝柱。裝完后柱床上端輕輕刮平,上好柱頭。

2、平衡

讓緩沖液以一定流速流過(guò)柱子,到流出液電導(dǎo)和pH不變。

3、上樣

(1)樣品用緩沖液配制,渾濁的樣品要離心和過(guò)濾后上樣。含鹽量過(guò)大、濃度過(guò)小的樣品要先做處理,再上樣。

(2)介質(zhì)對(duì)樣品組分的分離是按組分分子量大小進(jìn)行的,分子量大的先流出來(lái)。

(3)上樣體積約為柱體積的1~2%,越小分離越好。

4、洗脫

用緩沖液洗脫,洗脫中保持流速、緩沖液組成不變。

5、再生

一般用緩沖液洗到平衡,可再次使用。

6、在位清洗

(1)對(duì)于以離子鍵結(jié)合上去的蛋白,可以用2M Nacl去除。

(2)對(duì)沉淀蛋白、對(duì)以疏水性結(jié)合的蛋白或脂類,可用1M NaOH 去除。

(3)對(duì)強(qiáng)疏水性結(jié)合的蛋白、脂類等,用4~10倍柱體積的70%乙醇或30%異丙醇清洗,但要注意有機(jī)溶劑的濃度以梯度的方式逐漸增加,否則容易產(chǎn)生氣泡。

清洗完畢后,用少3倍緩沖液平衡柱子。

7、注意

在裝柱、使用和保存柱子的時(shí)候,要避免柱子流干,氣泡進(jìn)入。

8、去熱源

用0.5M的氫氧化鈉清洗柱子5~6小時(shí)或用0.1M的氫氧化鈉24小時(shí)。或用以下方法步驟去除:

(1)2倍柱體積的70%乙醇;

(2)2倍柱體積50mM Tris-HCl pH7.5;

(3)1倍柱體積4M尿素;

(4)3倍柱體積的Tris緩沖液+0.1M Nacl;

以上緩沖液都在無(wú)熱源的雙蒸水中配制。

9、 消毒

用0.5~1M NaOH室溫下洗8~10倍柱體積,初始緩沖液平衡柱子。

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