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產(chǎn)品名稱:solarbio-DNA病毒基因組提取試劑盒

產(chǎn)品型號:D2400-50

產(chǎn)品報價:

產(chǎn)品特點:solarbio-DNA病毒基因組提取試劑盒
本試劑盒適合于從血清、細(xì)胞上清、淋巴液中提取DNA病毒基因組,不適合于RNA病毒基因組的提取。使用本試劑盒提取的基因組DNA可用于各種常規(guī)操作,包括酶切、PCR、文庫構(gòu)建、Southern雜交等實驗。

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D2400-50solarbio-DNA病毒基因組提取試劑盒的詳細(xì)資料:

貨號產(chǎn)品名稱規(guī)格價格
D2400-50DNA病毒基因組提取試劑盒50T400.00
D2400-100DNA病毒基因組提取試劑盒100T700.00

solarbio-DNA病毒基因組提取試劑盒
本試劑盒適合于從血清、細(xì)胞上清、淋巴液中提取DNA病毒基因組,不適合于RNA病毒基因組的提取。使用本試劑盒提取的基因組DNA可用于各種常規(guī)操作,包括酶切、PCR、文庫構(gòu)建、Southern雜交等實驗。操作步驟: 使用前請先在漂洗液中加入無水乙醇,加入體積請參照瓶上的標(biāo)簽。所有離心步驟均為使用臺式離心機在室溫下離心。1、取病毒上清液0.5ml,12000rpm離心5min,盡量吸盡上清使用,棄去沉淀。2、向病毒上清中加入20ul 10mg/ml的蛋白酶K,充分混勻,65℃消化10-20min,期間可顛倒離心管混勻數(shù)次。3、向管中加入500ul結(jié)合液,充分混勻。再向管中加入400ul無水乙醇,充分混勻,此時可能會出現(xiàn)絮狀沉淀,不影響DNA的提取,可將溶液和絮狀沉淀都加入吸附柱中,靜置2min。(吸附柱的大容積為750ul,可分兩次加入。一次吸附完離心后再將余下的混合液體加入柱中靜置離心。) 4、 12000rpm離心2min,棄廢液,將吸附柱放入收集管中。5、向吸附柱中加入700ul漂洗液(使用前請先檢查是否已加入無水乙醇),12000rpm離心1min,棄廢液,將吸附柱放入收集管中。6、向吸附柱中加入500ul漂洗液,12000rpm離心1min,棄廢液,將吸附柱放入收集管中。7、 12000rpm離心2min,將吸附柱置于室溫或50℃溫箱放置數(shù)分鐘,目的是將吸附柱中殘余的漂洗液去除, 否則漂洗液中的乙醇會影響后續(xù)的實驗如酶切、PCR等。8、將吸附柱放入一個干凈的離心管中,向吸附膜中央懸空滴加50ul-100ul經(jīng)65℃水浴預(yù)熱的洗脫液,室溫放置5min,12000rpm離心1min。9、離心所得洗脫液再加入吸附柱中,室溫放置2min,12000rpm離心2min,即可得到高質(zhì)量的病毒基因組DNA。

solarbio-DNA病毒基因組提取試劑盒

注意事項:
1、試劑盒拆封后,蛋白酶K需放置-20℃保存。
2、樣品應(yīng)避免反復(fù)凍融,否則會導(dǎo)致提取的DNA段較小且提取量也下降。
3、若結(jié)合液中有沉淀,可在37℃水浴中重新溶解再使用,不影響效果。
4、洗脫緩沖液的體積好不少于50ul,體積過小會影響回收效率。洗脫液的pH值對洗脫效率也有影響,若需要用水做洗脫液應(yīng)保證其pH值在8.0左右(可用NaOH將水的pH值調(diào)此范圍),pH 值低于7.0會降低洗脫效率。DNA產(chǎn)物應(yīng)保存在-20℃,以防DNA降解。
5、DNA濃度及純度檢測:得到的基因組DNA段的大小與病毒的保存條件和種類等因素有關(guān)。D260值為1.0相當(dāng)于大約50 ug/ml雙鏈DNA、40 ug/ml單鏈DNA。OD260/OD280比值應(yīng)為1.7-1.9,如果洗脫時不使用洗脫緩沖液,而使用去離子水,比值會偏低,因為pH值和離子存在會影響光吸收值,但并不表示純度低。6、如果病毒含量過低,后提取的基因組DAN電泳可能無法檢測到,但PCR等其他實驗還會有結(jié)果。


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