无码人妻精品一区二区蜜桃,yin荡娇妻肉欲放纵,农村女妓女野外bbw,欧美大肥婆bbbww

歡迎來北京索萊寶科技有限公司!我們將為您提供周到的服務!
首頁 > 產(chǎn)品中心 > 基因工程 > 基因組和質粒提取試劑盒 > Solarbio-酵母質粒小量提取試劑盒

產(chǎn)品名稱:Solarbio-酵母質粒小量提取試劑盒

產(chǎn)品型號:D1160-50

產(chǎn)品報價:

產(chǎn)品特點:Solarbio-酵母質粒小量提取試劑盒
本試劑盒采用酶法破碎酵母細胞壁和堿裂解法裂解酵母細胞來提取酵母質粒DNA。所采用的酵母破壁酶能有效地破壞酵母細胞壁,提高酵母質粒DNA的產(chǎn)量。吸附柱中采用的硅基質材料能高效、專一地吸附DNA,可限度去除雜質蛋白質及細胞中其他有機化合物。使用本試劑盒提取的酵母質粒DNA可適用于各種常規(guī)的分子生物學實驗,包括酶切、PCR、測序、連接和轉化等試驗。

免費咨詢:010-50973130

發(fā)郵件給我們:3193328036@qq.com

分享到:

D1160-50Solarbio-酵母質粒小量提取試劑盒的詳細資料:

Solarbio-酵母質粒小量提取試劑盒 

產(chǎn)品簡介:試劑盒采用酶法破碎酵母細胞壁和堿裂解法裂解酵母細胞來提取酵母質粒 DNA。所采用的酵母破壁酶能有效地破壞酵母細胞壁,提高酵母質粒 DNA 的產(chǎn)量。吸附柱中采用的硅基質材料能高效、專一地吸附 DNA,可限度去除雜質蛋白質及細胞中其他有機化合物。使用本試劑盒提取的酵母質粒 DNA 可適用于各種常規(guī)的分子生物學實驗,包括酶切、PCR、測序、連接和轉化等試驗。本試劑盒無需使用酚等有毒試劑,操作安全。操作步驟: 1、取 1-5ml 酵母培養(yǎng)物(不超過 5×107 cells),12000rpm 離心 1min,盡量吸除上清(菌液較多時可以通過多次離心將菌體沉淀收集到一個離心管中)。 2、酵母細胞壁的破除: A、酶法:向酵母菌體中加入 470ul 山梨醇 Buffer,充分懸浮菌體,加入 25ul 酵母破壁酶和 5ul 巰基還原劑,充分混勻,30℃處理 1-2h,期間可顛倒離心管混勻數(shù)次。12000rpm 離心 1min,棄上清,收集沉淀。向沉淀中加入 250ulYP1(請先檢查是否已加入 RNaseA),充分懸浮沉淀。注意:如果菌塊未*混勻,會影響裂解導致質粒提取量和純度偏低。  B、玻璃珠法:向酵母菌體中加入 250ul YP 1(請先檢查是否已加入 RNaseA),充分懸浮沉淀。加入 150-200ul 酸洗玻璃珠(自備),漩渦振蕩 10min。簡短離心使玻璃珠沉降到離心管底,吸取上清(如上清有所損失,請用 YP 1 補足 250ul)于另一干凈離心管中。 3、向離心管中加入 250ul YP2,溫和地上下翻轉 6-8 次使菌體充分裂解。注意:混勻一定要溫和,以免污染細菌基因組 DNA,此時菌液應變得清亮粘稠,作用時間不要超過 5 min,以免質粒受到破壞。 4、向離心管中加入 350ul YP3,立即溫和地上下翻轉 6-8 次,充分混勻,此時會出現(xiàn)白色絮狀沉淀。12000rpm 離心 10 min,用移液器小心地將上清轉移到另一個干凈的離心管中,盡量不要吸出沉淀。注意:YP3 加入后應立即混合,避免產(chǎn)生局部沉淀。如果上清中還有微小白色沉淀,可再次離心后取上清。 5、將上一步所得上清液加入吸附柱中,室溫放置 2min,12000rpm 離心 1min,倒掉收集管中的廢液,將吸附柱重新放回收集管中。 6、向吸附柱中加入 600ul 漂洗液(使用前請先檢查是否已加入無水乙醇),12000rpm 離心 1min,棄廢液,將吸附柱放入收集管中。 7、向吸附柱中加入 600ul 漂洗液,12000rpm 離心 1min,棄廢液,將吸附柱放入收集管中。 8、12000rpm 離心 2min,將吸附柱敞口置于室溫或 50℃溫箱放置數(shù)分鐘,目的是將吸附柱中殘余的漂洗液去除,否則漂洗液中的乙醇會影響后續(xù)的實驗如酶切、PCR 等。 9、將吸附柱放入一個干凈的離心管中,向吸附膜中央懸空滴加 50-200ul 經(jīng) 65℃水浴預熱的洗脫液,室溫放置 2min, 12000rpm 離心 1min。 10、為了增加質粒的回收效率,可將得到的洗脫液重新加入吸附柱中,室溫放置 2min,12000rpm 離心 1min。

Solarbio-酵母質粒小量提取試劑盒

注意事項:

1、使用前請先檢查 YP2 和 YP3 是否出現(xiàn)混濁,如有混濁現(xiàn)象,可在 37℃水浴中加熱幾分鐘,待溶液恢復澄清后再使用。 2、洗脫緩沖液體積不應少于 50ul,體積過小影響回收效率;洗脫液的 pH 值對洗脫效率也有影響,若需要用水做洗脫液應保證其 pH 值在 8.0 左右(可用 NaOH 將水的 pH 值調此范圍),pH 值低于 7.0 會降低洗脫效率;DNA 產(chǎn)物應保存在-20℃,以防 DNA 降解。 3、質粒得率與酵母菌株、質粒拷貝數(shù)、培養(yǎng)條件等因素有關。通常酵母質??截悢?shù)都很低,一般通過電泳或分光光度計法都很難檢測到,可通過 PCR 或轉化大腸桿菌來檢測。 4、DNA 濃度及純度檢測:得到的基因組 DNA 片段的大小與樣品保存時間、操作過程中的剪切力等因素有關。回收得到的 DNA 片段可用瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計檢測濃度與純度。DNA 應在 OD260 處有顯著吸收峰, OD260 值為 1 相當于大約 50 μg/ml 雙鏈 DNA、40 μg/ml 單鏈 DNA。OD260/OD280 比值應為 1.7-1.9,如果洗脫時不使用洗脫緩沖液,而使用去離子水,比值會偏低,因為 pH 值和離子存在會影響光吸收值,但并不表示純度低。

 

 相關同類產(chǎn)品:

留言框

  • 產(chǎn)品:

  • 您的單位:

  • 您的姓名:

  • 聯(lián)系電話:

  • 常用郵箱:

  • 省份:

  • 詳細地址:

  • 補充說明:

  • 驗證碼:

    請輸入計算結果(填寫阿拉伯數(shù)字),如:三加四=7

版權所有  ICP備案號: 管理登陸 技術支持:化工儀器網(wǎng)   總流量:881811  網(wǎng)站地圖

精产国品一二三产品区别在| 两腿间一大丛黑毛| 男人手伸进我内衣揉我胸到爽| 人妻熟女ΑⅤ一区二区三区| 女女车车的车车视频免费 | 自己撅起来乖乖挨c烂h| 国产+成+人| 日本少妇人妻xxxxx18| 小雪你的奶好大把腿张开| 甜性涩爱在线播放| 影音先锋2020色资源网| 天堂VA蜜桃一区二区三区| 少妇性荡欲午夜性开放视频剧场| 娇小w搡bbbb搡bbb| 亚洲国产精品无码久久sm| 18禁高h高辣小说文| 久久国产精品二国产精品| 乱妇乱女熟妇熟女网站| 日本添下边无码视频| 又长又粗又大又硬起来了| av无码专区| 美女100%裸体无遮挡| 人体张悠雨全身光一丝不| 国产成人精品亚洲日本在线观看 | 又硬又水多又坚少妇18P| 人妻偷人VA精品国产旡码| 亚洲av无码一区二区三区观看| 小sao货水好多真紧| 无码人妻精品一区二区蜜桃色| 亚洲精品在线| 欧美精品亚洲精品日韩专区| 人体欣赏SHOWYBEAUTY| 久久精品国产亚洲av香蕉| 最近免费字幕中文大全| 少妇激情av一区二区| 日本无遮挡边做边爱边摸| 第二十三章小莹的放纵| 亚洲色偷精品一区二区三区| 18禁美女黄网站色大片免费看| 国产真实乱人偷精品视频免费| 免费人成视频在线观看|